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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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綿羊星狀病毒通用PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4126
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-04-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4126
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

技術服務內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

綿羊星狀病毒通用PCR檢測試劑盒說明書

Ovine Astrovirus OAstVRTPCR

BKP4126

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
非洲綠猴腎細胞;BS-C-1NZYMBROTH,POWDERNZYM 肉湯, 粉末生物技術級粉末RTsigma

IFNGR1 Others Human IFNγR1 / CD119 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-溴炳同醋 BroMopyruvic ccid 1113-29-3

豹貓肌肉成纖維樣細胞;LCM4詹納斯綠 B Janus Green B (certified by the Biolog... 2869-83-2 1G 染色劑

IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照) 威斯塔霉素,英文名或英文縮寫:Ribostamycin Sulfate salt,級別:BR<62.5 μg/ml,規(guī)格:1

JEG-3 人細胞(錄化)
2.
皮膚細胞系統(tǒng)三糖Melezitose hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,進分

U251人細胞聚乙二醇20000PEG 20000質(zhì)量規(guī)格:BR

人結(jié)直腸腺癌細胞;COLO 205 大鼠腎動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL2-氨基噻唑(>98%BR)2-Aminothiazole質(zhì)量規(guī)格:>98%BR

MLA144 MLA144長臂猿瘤細胞氯化鈰七水Cerium (III) chloride, heptahydrate質(zhì)量規(guī)格:>99.9%

CHI3L2 Others Human CHI3L2 / YKL-39 人細胞裂解液 (陽性對照) D-阿拉伯糖醇(標準品)D(+)-Arabitol質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
綿羊星狀病毒通用PCR檢測試劑盒說明書PRKD3 Others Human PKC nu / PRKD3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 地塞米1酸鈉(標準品)Dexamethasone  Phosphate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH3D-蛋氨酸D-Mine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

RSC96細胞,大鼠雪旺細胞 人細胞,9204細胞 CL-0136L6(大鼠成肌細胞)5×106cells/瓶×2索非布韋Sofosbuvir (GS-7977)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

中國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610]D-鳥氨酸鹽酸鹽D-Ornithine monohydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACVR2B 人細胞裂解液 (陽性對照) D-苯丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽H-D-Phe-OtBu.HCI質(zhì)量規(guī)格:0.98
ECM1 Others Mouse
小鼠 ECM1 人細胞裂解液 (陽性對照) L-α--β-羥基,英文名或英文縮寫:L-Threonine,級別:BR99%,規(guī)格:10

人色素瘤細胞;A875BOC-L-天門冬酸β... Boc-Asp(OBzl)-OH (HPLC,99.0) 7536-58-5 5G 通用試劑

IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細胞裂解液 (陽性對照) 流醋亞鐵銨;馬爾氏鹽;低鐵礬;亞鐵銨礬;流醋低鐵銨;六水合流醋亞鐵銨;流醋亞鐵銨;六水合流醋鐵銨;六水合流醋鐵() Fqrrous cluM;Fqrrous cMMoniuM sulfctq;Mohr'sclt 7783-82-9

人肝竇內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL5-CTP4Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸四鈉鹽溶液5UUSP級,98%

LLC細胞,小鼠細胞 CHO(中國倉鼠卵巢細胞) 恒河猴肺細胞;RM-L1姆沙伯 P AW DMCSChromosorb P AW-DMCS

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:綿羊星狀病毒通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。


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