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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3805 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
高地病毒PCR檢測試劑盒直銷 | Highlands J VirusJRTPCR | BKP3805 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優勢:
1. 特異性:高地病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 人細胞裂解液 (陽性對照) CIN-1I培養基50克
人上皮細胞完全培養基 100mL4-安基偶氮本;隊安基偶氮本;安泥林皇;本安皇;隊安基二本基亞安;隊本基偶氮本安 4-cMinoczobqnzqnq;p-cMino-czobqnzqnq;p-cMinodiphqnyliMidq;cnilinq yqllow;Spirit yqllow;Oil yqllow B;p-Phqnylczocnilinq;C.I.11000; 1960-9-3
U2OS-Luc teT-on細胞,熒光素酶轉染人成細胞 枯草芽孢桿菌 小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-1聚乙酸酯50克RT
CCL3 Protein Human 重組人 CCL3 / Mip1a 蛋白 (His 標簽)TotalBLOTSOUTHERNKITWITHMEMBRANESOUTHERN 試劑盒(含膜)生物技術級RTsigma
LoVo(人細胞) 5×106cells/瓶×2 人 EDNRB / Endothelin B Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 4號瓊脂NA
大鼠肝細胞;BRL 3A托伐普坦 Tolvaptan質量規格:度≥99.0%,BR,可用于細胞培養
GDF15 Others Human 人 GDF-15 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺噻唑Sulfathiazole質量規格:>99%,BR
小鼠胚胎成纖維細胞MEF磺胺噻唑(標準品)Sulfathiazole質量規格:含量測定
MARK3 Others Human 人 MARK3 / CTAK1 / EMK-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 環苯扎林鹽酸鹽Cyclobenzaprine HCl質量規格:>99%,BR
人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1鹽酸美托咪定Medetomidine HCl質量規格:≥99.0%,BR
高地病毒PCR檢測試劑盒直銷HCT116/L 人耐奧沙利鉑耐藥株alpha-熊果苷(標準品)alpha-Arbutin 質量規格:HPLC≥98%,標準品
SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) L-羥基脯氨酸(標準品)L-Hydroxyproline質量規格:HPLC≥98%,標準品
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株;7WCY1.0L-羥基脯氨酸L-Hydroxyproline質量規格:>99%,BR
SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細胞裂解液 (陽性對照) L-正亮氨酸L-Norleucine質量規格:>98%,BR
人臍帶單核細胞完全培養基 100mLFmoc-D-4-苯丙氨酸Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH質量規格:HPLC>98%
Promocell C-28051 Monocyte Attachme Medium, 單核細胞附著培養基(即用型) 250ml薄荷醇(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Menthol
人上皮樣細胞;BEAS-2B補骨脂定(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Psoralidin
DCBLD2 Others Human 人 DCBLD2 / ESDN / CLCP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 補骨脂二氫黃酮;補骨脂甲素質量規格:HPLC≥98%,標準品Bavachin
CL-0368INS-1(大鼠胰島細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2補骨脂酚(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Bakuchiol
EL4IL-2細胞,瘤細胞 人急性早幼粒細胞,NB4細胞 人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)D-(-)-奎寧酸(標準品)質量規格:≥98%,標準品D-(?)-Quinic acid