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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 人喉鱗癌細(xì)胞直銷(xiāo)
簡(jiǎn)稱(chēng)：PCI-04B

種屬：人

來(lái)源：喉鱗癌；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE01490
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人喉鱗癌細(xì)胞直銷(xiāo)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
6-Aminouracil  873-83-6  中文名：6-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2  度：98.0%      小鼠損傷分子1(Kim-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

6-Aminoquinoxaline  6298-37-9  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3  度：98.0%      小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

6-Aminopenicillanic acid  551-16-6  中文名：6-氨基青霉烷酸  分子式：C8H12N2O3S  度：98.0%      小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

6-Aminonicotinic acid  3167-49-5  中文名：6-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%      小鼠纖連蛋白(FN)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

6-Aminoindole  5318-27-4  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2  度：98.0%      小鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Deferasirox  201530-41-8  中文名：地拉羅司  分子式：C21H15N3O4 

小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Deflazacort  中文名：地夫可特  分子式：C25H31NO6  度：98.0%

小鼠谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶（GST）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Deferasirox  中文名：地拉羅司  分子式：C21H15N3O4  度：99.0%

小鼠谷胱甘肽過(guò)氧化酶（GSH-Px）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Deferasirox  中文名：地拉羅司  分子式：C21H15N3O4 

小鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Deferasirox  201530-41-8  中文名：地拉羅司  分子式：C21H15N3O4  度：99.0%
Stigmast-5-ene-3β,7α,16β-triol  289056-24-2  中文名：  分子式：C29H50O3    HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-ⅣELISAKit人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Sitosteryl palmitate  2308-85-2  中文名：β-谷甾醇棕櫚酸酯  分子式：C45H80O2    兔子紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

22-Dehydroclerosterol glucoside  143815-99-0  中文名：  分子式：C35H56O6    Human thymus depende aigen (TD-Ag) ELISA Kit 人胸腺依賴性抗原(TD-Ag)ELISA試劑盒

22-Dehydroclerosterol  26315-07-1  中文名：22-去氫赤桐甾醇  分子式：C29H46O    Humanai-redcellaibodyELISAKit 人抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Stigmastane-3β,5α,6β-triol  20835-91-0  中文名：豆甾-3β,5α,6β-三醇  分子式：C29H52O3    humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember2ELISA試劑盒人嗜酸性相關(guān)之RNA水解酵素家族成員2(EAR2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人喉鱗癌細(xì)胞直銷(xiāo)Senkyunolide H  94596-27-7  中文名：  分子式：C12H16O4  度：96.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Senkyunolide G  94530-85-5  中文名：洋川芎內(nèi)酯G  分子式：C12H16O3  度：%  關(guān)鍵詞：    小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Senkyunolide E  94530-83-3  中文名：  分子式：C12H12O3  度：%  關(guān)鍵詞：  川芎; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠血小板相關(guān)抗體IgG   英文名稱(chēng)：   platelet-associated aibody IgG   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   PAIgG

Senkyunolide C  91652-78-7  中文名：洋川芎內(nèi)酯C  分子式：C12H12O3  度：96.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠增殖細(xì)胞核抗原   英文名稱(chēng)：   Proliferating Cell Nuclear Aigen   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   PCNA

Schleicheol 2  256445-68-8  中文名：  分子式：C30H52O2  度：%  關(guān)鍵詞：  豆甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠血小板生長(zhǎng)因子   英文名稱(chēng)：   plateler-derived growth factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   PDGF
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。