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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | E0105 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 浸潤性導(dǎo)管癌；女性 |
| 細胞形態(tài) | 詳見說明書 |
| 是否是腫瘤細胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 貼壁 |
| 物種來源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | 瓶 |
| 純度 | 詳見說明書% |
| 是否進口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱：BT-474 [BT474]細胞
中文名稱：人乳腺導(dǎo)管癌細胞
規(guī)格：瓶
種屬：人
來源：浸潤性導(dǎo)管癌；女性
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：貼壁
單位:
貨號：E0105
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
BT-474 [BT474]細胞 | 瓶 | E0105 |
帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應(yīng)管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。
帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細胞實驗用（一般性的傳代，保存細胞，為實驗提供細胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項：
1.細胞復(fù)蘇
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%（過量不足，過晚細胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細胞一代，即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度）進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細胞凍存
當(dāng)細胞密度達到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護細胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。
細胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷，引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進而促使細胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：
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代森鋅 Zineb 質(zhì)量規(guī)格：>90% 人鼻病毒(RV)抗體(IgA)試劑盒 Human rhinovirus(RV)aibody(IgA)ELISA kit
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延齡草苷（標準品） Diosgenin glucoside 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISA試劑盒豬樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
N-反式-對香豆酰酪胺(標準品) N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒 ，英文名： CTX-2 ELISA Kit
OK負鼠腎細胞 OK opossum kidney cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(粗顆粒)質(zhì)量規(guī)格：分類范圍3×100000Sephadex G-50
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MS751(人子宮頸表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2 Ana-1(巨噬細胞)利拉萘酯(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Liranaftate
MGC80-3(MGC-803)人細胞萘普生鈉質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,BRNaproxen
GDNF Others Human 人 GDNF 人細胞裂解液 (陽性對照) 萘普生鈉（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Naproxen
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DPP7 Others Mouse 小鼠 DPP7 / DPPII / DPP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 標準溶液(1000μg/ml,溶劑：水)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,溶劑：水Iodine solution
小鼠成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL鈧標準溶液(1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3Scandium standard
BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細胞 BALB/3T3 clone A31 mouse embryo fibroblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBSL-羥基脯氨酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品L-Hydroxyproline
IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白L-羥基脯氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-Hydroxyproline
注意事項：
BT-474 [BT474]細胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴格的無菌操作；
（6）貼壁細胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作，每種細胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
